TLR4/NF-κB对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡的影响
Effects of TLR4/NF-KB on proliferation and apoptosis in asthmatic rat airway smooth muscle cells
摘要目的 探讨Toll样受体4(Toll like receptors4,TLR4)/核因子-κB(Nuclear Factor Kappa B,NF- κB)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡的影响.方法 体外培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞,将细胞分为空白对照组、TNF-α组、(TNF-α+PDTC)组和(TNF-α+TLR4)抗体组.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法检测ASMCs增殖反应,用TUNNEL法检测ASMCs凋亡情况,用ELISA检测细胞培养上清液中NF-κB的蛋白含量,用RT-PCR、Westem blot检测各组细胞TLR4的mRNA和蛋白表达水平.结果 TNF-α组ASMCs的增殖反应与对照组相比增加,差异有显著性(P<0.05),(TNF-α +PDTC)组、(TNF-α +TLP4)抗体组ASMCs增殖反应显著低于TNF-α处理组(P<0.01),(TNF-α+PDTC)组与对照组相比差异无显著性(P>0.05),(TNF-α +TLR4)抗体组ASMCs增殖反应显著低于对照组(P<0.01);TNF-α处理组细胞凋亡率与对照组相比差异无显著性(P>0.05),(TNF-α+PDTC)组和(TNF-α +TLP4)抗体组细胞凋亡率显著高于TNF-α处理组(P<0.01)及对照组(P<0.01);TNF-α组NF- κB含量显著高于对照组、(TNF-α+PDTC)组及(TNF-α+TLR4)抗体组(P<0.01);(TNF-α +PDTC)组与(TNF-α +TLR4)抗体组之间差异无显著性(P >0.05);TNF-α组TLR4mRNA表达水平明显高于对照组及(TNF-α +TLR4)抗体组(P<0.05);(TNF-α +TLR4)抗体组TLR4mRNA表达水平与对照组之间差异无显著性(P>0.05);TNF-α组TLR4蛋白表达水平显著高于对照组及(TNF-α+TLR4)抗体组(均P<0.01);对照组TLR4蛋白表达水平显著高于TNF-α+TLR4抗体组(P<0.01).结论 TLR4可能通过NF-κB参与哮 喘大鼠气道平滑肌细胞增殖凋亡.
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