血红蛋白诱导的HO-1对离体星形胶质细胞损伤作用的研究

The role of heme oxygenase-1 on hemoglobin-induced astrocytes injury in vitro

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摘要目的探讨血红蛋白(hemoglobin,Hb)诱导的血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)对离体星形胶质细胞的损伤作用.方法体外培养纯化获得星形胶质细胞,采用荧光标记胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)鉴定细胞；实验分为正常组、Hb组及HO-1活性抑制剂锌原卟啉(ZnPPIX)+Hb 组.Hoechst 33342及CCK-8法检测细胞损伤情况；Western blot检测HO-1、p-JNK、JNK、Bcl-2及Bax等蛋白的表达情况；RT-PCR检测HO-1的mRNA表达情况.结果 GFAP鉴定显示97％以上的细胞为星形胶质细胞；HO-1检测结果显示:40μmol/L的Hb可显著诱导HO-1 mRNA及蛋白的表达(P＜0.001)；Hoechst 33342及CCK-8检测结果显示:40μmol/L的Hb对离体星形胶质细胞具有损伤作用,而ZnPPIX可明显减轻上述损伤；Western blot检测结果显示:HO-1被诱导高表达时p-JNK及Bax蛋白的表达水平也显著升高而Bcl-2蛋白的表达水平显著下降(P＜0.01),ZnPPIX处理后与Hb组相比p-JNK及Bax蛋白表达水平有所降低而Bcl-2蛋白表达水平则有所升高(P＜0.05).结论 40μ mol/L Hb诱导的HO-1对离体星形胶质细胞具有损伤作用.

作者陈浩 ^[1] 王兴启 ^[2] 崔桂云 ^[1] 赵辉 ^[3] 宋远见 ^[4] 高丽 ^[5] 荆佳 ^[1] 沈霞 ^[1] 学术成果认领

作者单位徐州医学院附属医院神经内科,江苏徐州,221004 ^[1] 南京大学生命科学学院,江苏南京,210093 ^[2] 徐州市中心医院神经内科,江苏徐州,221009 ^[3] 徐州医学院神经生物学教研室,江苏徐州,221004 ^[4] 南京医科大学附属脑科医院神经内科,江苏南京,210029 ^[5]

关键词血红蛋白血红素氧合酶-1 星形胶质细胞 Bcl-2 JNK

主题词蛋白(Egg White)细胞(Cells)创伤和损伤(Wounds and Injuries)血红素(Heme)氧(Oxygen)

分类号 R743

栏目名称论著

DOI 10.3969/j.issn.1005-8982.2011.31.002

发布时间 2012-03-20

基金项目

国家自然科学基金 江苏省教育厅课题 江苏省脑病生物信息重点实验室开放课题