差异显示cDNA转染DC细胞在肿瘤生物治疗中作用
The effect of dendritic cell transfected with differential displaying cDNA in biotherapy
摘要目的 通过差异显示技术筛选肿瘤细胞差异性基因并转染到树突状细胞中,验证转染后DC所诱导的CTL杀伤效能.方法 将Lewis肺癌细胞种植在C57BL/6J小鼠后,取肿瘤组织和正常组织进行差异显示反转录PCR技术分析鉴定,得到的差异显示基因经测序后,构建pcDNA3.1-DD-cDNA质粒,经脂质体转染至未成熟树突状细胞中.分别通过体内体外实验检验树突状细胞诱导的细胞毒T细胞的杀伤活性.结果 筛选出Lewis肺癌细胞的一条DD-cDNA的长度为730 bp,通过与Genbank序列数据库进行同源性比对,未发现同源性信息,为一全新基因.体内试验和体外试验中cDNA转染组CTL对肿瘤细胞杀伤效果均明显强于单纯肿瘤裂解物刺激组.结论 Lewis肺癌细胞表达一条肿瘤特异性基因,将其转染到树突状细胞中后,可以明显增强树突状细胞诱导的CTL的杀伤活性.
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