ERβ与其变异体对三阴性乳腺癌细胞株生长的影响

Influence of cell growth and Endocrine therapeutic effect of ERbeta transfected triple negative breast cancer cell line

二维码有效期 120s

摘要目的通过对三阴性乳腺癌细胞转染雌激素受体β (ERβ)及其5-8外显子缺失异构体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),试图了解ERβ单独表达对癌细胞生长的影响,及对雌激素、三苯氧胺(tamoxifen)作用的反应性；探讨ERβ是否有可能成为三阴性乳腺癌内分泌治疗的预测因子和新的治疗靶点.方法 ①构建真核细胞表达克隆pReceiver-M72-ER β及其剪切体pReceiver-M72-ER β△.②脂质体法转染人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231,设ERβ组、ERβ△组、空载体组及空白对照四组.③转染后荧光显微镜检,免疫荧光、免疫细胞化学、Western Blot等方法验证蛋白表达.按实验设计分别加入不同药物浓度的三苯氧胺、雌激素.④流式细胞术观察细胞周期情况.MTT法检测细胞相对活性.结果 ①以IRES2-EGFP为蓝本改造的pReceiver-M72-ERβ及其剪切体pReceiver-M72-ERβ△成功构建.②转染ERβ后细胞生长速度加快,细胞周期中G1期比例减少,S期比例增加,克隆形成能力增强；转染ERβ△后细胞系相对活性及细胞周期未见明显改变；雌激素及tamoxifen对转染ER β及其剪切体ERβ△的细胞生长无明显影响.结论 ERβ单独表达促进MDA-MB-231细胞生长,增加细胞相对活性及克隆形成能力；转染ERβ的三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中对雌激素及雌激素抑制剂tamoxifen无明显反应.