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生物珊瑚人工骨支架材料生物相容性检测

Biocompatibility test of biological coral artificial bone as scaffold materials

摘要目的 评价生物珊瑚人工骨( BCAB)材料作为骨组织工程支架材料与小鼠胚胎干细胞(MESCs)构建组织工程骨的有效性及材料生物相容性.方法 设MESCs与BCAB支架材料混合黏附培养为实验组,单纯MESCs培养为对照组,分别于第2、4、6、8天进行MTT法检测细胞增殖活性,特异性胚胎抗原-1检测细胞对材料的黏附性.于第8日对接种细胞材料片行成骨诱导,诱导培养10d后行茜素红染色及电镜扫描检测成骨诱导及体外组织工程骨构建情况.取12只大鼠,脊柱左侧皮下植入空白BCAB支架片状材料,右侧植入黏附细胞BCAB片状材料,随机分4、8、12周3组行影像学检查,并取双侧标本行病理切片观察局部炎症反应,四环素标记下荧光显微镜观察成骨情况.第12周组取心、肝、肾病理切片及评估心、肝、肾毒性反应.结果 MTT法检测细胞增殖活性结果显示,在培养2d和4d时实验组与对照组间MTT值差异无统计学意义(P>0.05),在6d及8d时实验组MTT值明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).特异性胚胎抗原-1检测证实MESCs对BCAB支架材料具有良好的黏附性,在其三维微孔隙内能较快增殖.茜素红染色及电镜扫描检测证实黏附细胞材料成骨诱导有效,体外组织工程骨构建成功.材料植入局部组织炎症反应轻,空白支架材料于第8周开始降解,12周达初步降解,无异位成骨;黏附细胞支架材料则有明显异位成骨现象,且较对侧空白支架材料降解时效延长.第12周组实验动物心、肝、肾标本病理切片未见异常损害.结论 BCAB支架材料具有良好的生物相容性,其降解周期与新骨重建周期大致相当,是一种良好的骨组织工程支架材料.

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