换一批
换一批摘要目的 利用分子生物技术构建人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因腺病毒表达载体并检测hTERT基因腺病毒转染细胞的功能表达.方法 用凝胶电泳、测序、Western blotring等鉴定hTERT质粒.用PcR技术扩增hTERT基因,构建hTERT-PIRES2-EGFP基因载体,重组到pAd腺病毒,转染293A细胞扩增病毒.终点稀释分析法测病毒滴度.CsCl连续梯度离心纯化.结果 凝胶电泳、测序和Western blotting检测hTERT基因分子量、序列以及功能是正确的.并且成功构建hTERT腺病毒,病毒浓度达2.1×1012 ifu/mL.结论 成功构建hTERT腺病毒,为hTERT基因治疗的基础研究和动物实验研究奠定了基础.
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