换一批
换一批小干扰RNA抑制膀胱尿路上皮癌T24细胞hTERT基因表达的体内外实验研究
Studies of hTERT gene transfection by small interfering RNA into bladder urothelium carcinoma T24 cell lines inhibition proliferation in vivo and in vitro
摘要目的 探讨转染小干扰RNA抑制膀胱尿路上皮癌T24细胞hTERT基因表达及对膀胱尿路上皮癌动物模型抑瘤率的影响,以探讨抑制hTERT基因实现抗肿瘤的作用,为膀胱尿路上皮癌的基因治疗提供新思路.方法 以LipofectaminTM脂质体介导小干扰RNA转染膀胱尿路上皮癌T24细胞株；通过绘制细胞生长曲线、MTT比色法以及流式细胞仪检测观察小干扰RNA转染对T24细胞增殖的影响,PCR、Northern分析检测hTERT基因在T24细胞的表达,WesternBlot检测蛋白表达,T24细胞接种于裸鼠,分组给予抑制hTERT基因转染进行治疗,评价其抑瘤率.结果 小干扰RNA抑制hTERT基因的表达可以抑制T24细胞的体外生长,实验组细胞的生长曲线较对照组明显降低；MTT比色显示实验组的细胞活力与对照组相比有显著性差异(P ＜0.05)；PCR及Northern分析提示小干扰RNA抑制hTERT基因表达,WesternBlot检测到蛋白低表达；流式细胞仪检测显示基因转染使瘤细胞的生长滞留在G0+G1期,S期细胞明显减少,并观察到细胞凋亡.动物实验小干扰RNA抑制hTERT基因肿瘤抑制率可达34.4％,显著高于对照组(P＜0.05),且两组间差异具有显著性(P =0.032).结论 小干扰RNA转染抑制hTERT基因表达对T24细胞具有体内外抗肿瘤的作用,提示小干扰RNA转染T24细胞抑制hTERT基因技术有可能为膀胱尿路上皮癌的基因治疗提供一种新的治疗策略与手段.
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