内皮细胞条件培养液对血管平滑肌细胞增殖和ICAM-1、IL-1β分泌的影响

Endothelial cells conditioned medium on the proliferation and ICAM-1, IL-1βof the vascular smooth muscle cell

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摘要目的探讨内皮细胞活化对血管平滑肌细胞增殖和分泌的影响及其机制.方法 TNF-α(10ng/mL)刺激血管内皮细胞6h后收集条件培养液为A液,未加TNF-α的内皮细胞培养液为B液,以ELISA法测定IL-6水平.血管平滑肌细胞接种于培养板中分为3组:①刺激组按1∶1比例加入A液和DMEM培养液,②无刺激组按1∶1比例加入B液和DMEM培养液,③对照组仅加入DMEM培养液.分组后立即采集少量细胞上清液以ELISA法测定ICAM-1、IL-8和IL-6水平.继续培养24 h后,再次采集上清液测定ICAM-1和IL-8水平,收集血管平滑肌细胞以MTT法检测细胞增殖情况.结果 A、B液中IL-6水平分别为(122.70±6.30)pg/mL,(31.16±2.94)pg/mL,二者有显著性差异(t=22.807,P＜0.05).研究结束时,三组平滑肌细胞的MTT值依次为(1.349±0.115)、(1.012±0.087)和(0.798±0.014),与培养液中的IL-6水平呈正相关(r=0.825,P＜0.001).三组细胞上清液中ICAM-1和IL-8均较基线值有所增加,其中刺激组ICAM-1和IL-8分别较基线升高(0.222±0.023)ug/L和(2.996±0.058)ng/mL,均高于对照组和无刺激组(P＜0.05).结论 TNF-α诱导内皮细胞活化,通过刺激IL-6释放,促进血管平滑肌细胞增殖和ICAM-1和IL-8等细胞因子的分泌.