褪黑素通过cAMP-PKA信号转导通路抑制黑色素瘤细胞VEGF表达

Melatonin inhibited the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) by blockage of cAMP-PKA pathway in melanoma cells

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摘要目的探讨褪黑素对人黑色素瘤细胞A375 VEGF表达的影响及其可能涉及的信号转导通路.方法用褪黑素、褪黑素受体拮抗剂、forskolin+褪黑素、8-brom-camp+褪黑素处理A375细胞,Real-time PCR、Western blot、ELISA等检测VEGFmRNA、蛋白表达的变化.结果 10μmol/L褪黑素处理A375细胞24 h后,VEGFmRNA的表达水平下降了48.7％(P ＜0.01)、细胞培养上清中VEGF蛋白表达水平下降了24.3％(P ＜0.01);10μmol/L褪黑素处理A375细胞6、12和24h后,胞浆中VEGF蛋白的表达水平分别下降了14.2％、27.3％和41.8％(P ＜0.01);10μmol/L褪黑素受体拮抗剂处理A375细胞24h后,胞浆、细胞培养上清中VEGF蛋白表达水平与对照组相比分别下降了32.3％和20.1％ (P ＜0.01);30μmol/L PKA激动剂(8-brom-camp)、500μmol/L腺苷酸环化酶激动剂(forskolin)处理A375细胞24 h后,胞浆VEGF的表达水平分别是对照组的1.58和2.24倍,细胞培养上清中VEGF的表达水平分别为对照组的1.65和2.39,与褪黑素组相比均差异有显著性(P＜0.01).结论褪黑素可下调A375细胞VEGF的表达,其作用机制可能是通过褪黑素受体阻断cAMP-PKA信号转导通路所致.