体外靶向PI3K基因RNA干扰对卵巢癌SKOV3细胞Akt表达的影响

Effects of PI3K-gene-targeted RNA interference on the expression of Akt in SKOV3 cells in vitro

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摘要目的采用RNA干扰技术沉默卵巢癌SKOV3细胞中PI3K/Akt信号转导通路中关键基因PI3Kp110 α,观察其对PI3K/Akt信号通路下游信号蛋白Akt的影响,以期为卵巢癌的基因治疗提供可靠的理论依据.方法体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,脂质体介导靶向P13Kp110 α基因的小干扰RNA(siRNA)转染卵巢癌SKOV3细胞,采用荧光定量PCR法检测干扰后PI3K、Akt mRNA的表达,免疫荧光双标法观察RNA干扰48 h后对PI3K、Akt蛋白的影响.结果 Real-time PCR结果示RNA干扰组PI3K、Akt mRNA相对含量显著低于空白载体组和对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05),而空白载体组与对照组表达差异无统计学意义(P＞0.05);免疫荧光细胞化学结果示RNA干扰组的PI3K、Akt蛋白阳性率较对照组与空白载体组明显减少,而对照组与空白载体组比较无明显差异.结论 siRNA可沉默卵巢癌SKOV3细胞P13Kp 110α基因的表达,同时减轻PI3K蛋白及下游信号蛋白Akt的表达,以PI3Kp110α为靶点的RNA干扰技术可望成为卵巢癌基因治疗的新策略.