换一批
换一批摘要目的 建立一种可用于高通量筛选调节连接蛋白43(Cx43)表达药物的方法.方法 PCR法扩增到Cx43启动子,构建Cx43启动子-绿色荧光蛋白(GFP)逆转录表达我体,包装病毒感染肝癌细胞株BEL7402建立稳定表达细胞系,接种于96孔板,加促Cx43表达药物全反式维甲酸(ATRA)0、5、10、20、30和40μmol/L处理细胞24、48和72 h,用多功能酶标仪分析绿色荧光强度改变,以此反映药物对Cx43表达的影响,检验该方法能否用于调节Cx43表达药物高通量筛选.结果 成功构建Cx43启动子-GFP逆转录表达载体,并获得Cx43启动子驱动GFP稳定表达的BEL7402细胞系,10μ mol/L RA组荧光强度明显高于对照组(P＜0.01).结论 该Cx43启动子-GFP逆转录表达系,配合多功能酶标仪分析,可用于影响Cx43表达中药的高通量筛选,该方法的建立为筛选调节Cx43表达的药物提供了一种有效的技术手段.
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主题词
连接蛋白43(Connexin 43)药用制剂(Pharmaceutical Preparations)方法(Methods)高通量筛选分析(High-Throughput Screening Assays)荧光(Fluorescence)
分类号
R965.1
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2013.27.005
发布时间
2016-01-23
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