联合应用Survivin和VEGF反义寡核苷酸对肺癌A549细胞的抑制作用

Effect of antisense oligonucleotide targeting Survivin and VEGF on the inhibition of A549 cells

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摘要目的研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞经Survivin和VEGF反义寡核苷酸(ASODN)单独和联合转染后细胞生长、凋亡以及对基因表达的抑制作用.方法针对Survivin和VEGF mRNA序列设计反义寡核苷酸,以脂质体(Lip)为载体,介导Survivin和VEGF ASODN单独和联合转染A549细胞.MTT法检测细胞生长抑制率,RT-PCR检测细胞中Survivin和VEGF基因的mRNA含量,流式细胞术检测细胞凋亡以及细胞中Survivin基因的蛋白表达.结果经脂质体转染后200 ～ 600 nmol/L Survivin ASODN和5～ 20μmol/L VEGF ASODN均能抑制A549细胞增殖,诱导细胞凋亡;在48 h时,400 nmol/LSurvivin ASODN和10μmol/L VEGF ASODN抑制率和凋亡率有统计学意义(P＜0.05);两者联合转染A549细胞抑制率和凋亡率分别为(61.37±1.94)％和57.03％,显著高于两基因单独转染(P＜0.05);联合组的Survivin rnRNA的表达量为(15.26±1.31)％,蛋白表达率为(30.40±1.33)％,VEGFmRNA的表达量为(13.12±1.45)％,均显著低于单独转染组(P＜0.05).结论 Survivin和VEGF ASODN均能抑制A549细胞基因表达,诱导细胞凋亡,两基因反义寡核苷酸联合转染的效果优于单独转染.