换一批
换一批摘要目的 研究叶酸对新生SD大鼠神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响及其相关作用机制.方法 24 h内新生SD大鼠全脑分离NSCs,分为4组:①正常对照组(Control);②叶酸缺乏组(MTX),添加甲氨蝶呤0.4μg/mL;③叶酸低剂量组(Folate-L),添加叶酸4μg/mL;④叶酸高剂量组(Folate-H),添加叶酸40μg/mL.采用MTT法、生长曲线法检测叶酸对NSCs增殖的影响;培养6d后用含10％胎牛血清的培养基进行分化培养,分化第7天采用共聚焦激光扫描荧光双重染色观察叶酸对NSCs分化为星型胶质细胞及神经元细胞比例的影响;并采用Western Blot检测给予叶酸对NSCs细胞中Notch和Erk蛋白表达的影响;阻断Erk信号通路后,观察叶酸对NSCs分化为星型胶质细胞比例的影响.结果 经鉴定分离培养的原代细胞为神经干细胞.MTT结果显示,与对照组相比,两叶酸干预组NSCs增殖较快(P＜0.01);分化后免疫荧光双标试验中,与对照组相比,两叶酸干预组NSCs向星型胶质细胞分化的比例差异具有显著性(P＜0.01),两叶酸干预组NSCs向神经元分化的比例差异不具有显著性(P＞0.05);Western Blot结果显示NSCs增殖过程中,两叶酸组NSCs中Notch和Erk蛋白表达明显增加,而在NSCs分化过程中,两叶酸组NSCs中Notch蛋白表达显著降低,Erk蛋白表达明显增加;阻断Erk信号通路后,叶酸诱导NSCs分化为星型胶质细胞比例显著降低(P＜0.01).结论 叶酸可通过调控Notch和Erk信号通路促进NSCs增殖及向星型胶质细胞分化.
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