换一批
换一批人热休克蛋白72转染人脂肪间充质干细胞的研究
Transfection and expression of human heat shock protein 72 gene mediated by adenoviral vector into human adipose derived stem cells
摘要目的 观察人热休克蛋白72(HSP72)基因体外转染人脂肪间充质干细胞(ASCs)及其HSP72表达情况.方法 通过腹部取皮术获得的皮下脂肪利用胶原酶消化法进行体外分离培养,体外扩增至第3代,用腺病毒载体系统将人源性HSP72转染至第3代ASCs,在倒置荧光显微镜下观察转染后的细胞形态和生长变化,应用实时荧光定量PCR、Westem blot法鉴定HSP72在ASCs中的表达.结果 皮下脂肪经消化,体外培养可获得ASCsP3代;ASCs转染24 h后,绿色荧光蛋白表达明显增强.经实时荧光定量PCR证实转基因ASCs表达HSP72mRNA在24 h后逐渐增强.Western blot检测证实转基因ASCs在24h后出现特征条带,而空白组未出现条带.结论 采用腺病毒介导的基因转染技术可将HSP72基因转染至ASCs中,并可以在HSP72mRNA和蛋白中有效表达,ASCs可以作为HSP72基因治疗的载体.
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分类号
R329.2
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1005-8982.2014.33.005
发布时间
2016-01-23
基金项目
长沙市科技局基金
湖南省发展改革委员会一般项目
湖南省研究生创新项目
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