病毒感染对线粒体内膜肉毒碱棕榈酰转移酶-Ⅱ的影响
Effects of viral infection on mitochondrial inner membrane carnitine palmitoyltransferase-Ⅱ
摘要目的 位于细胞线粒体内膜肉毒碱棕榈酰转移酶-Ⅱ(CPT-Ⅱ)是脂肪酸代谢的限速酶,本文分析了病毒感染对CPT-Ⅱ的影响.方法 从病毒感染后患者外周血中制备CPT-Ⅱ-DNA,扩增其所有外显子,插入pGEM-T载体,T4 DNA连接酶连接,构建pGEM-T-CPT-Ⅱ质粒,转化大肠杆菌DH5α、制备阳性质粒、EcoR Ⅰ酶切、测序和变异分析.结果 成功构建重组表达质粒pGEM-T-CPT-Ⅱ,经DNA测序证实质粒中插入CPT-Ⅱ所有外显子完整序列,全长1 974个核苷酸,编码658个氨基酸组成的肽链;与源序列比较,肽链出现两个变异位点:1618(G→A)和1858(T→C),氨基酸分别置换为V368I和F448L.结论 CPT-Ⅱ变异分析,有助于探讨病毒感染对线粒体损伤和脂肪酸氧化的影响.
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