盐酸戊乙奎醚对大鼠小肠组织自噬的影响

Protective effects of penehycllidine hydrochloride on autophagy in small intestine caused by limb ischemia-reperfusion injury in rats

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摘要目的观察盐酸戊乙奎醚(长托宁)对大鼠肢体缺血再灌注损伤(LIRI)诱发小肠组织自噬的影响.方法采用大鼠肢体缺血再灌注损伤模型,选用雄性SD大鼠48只,按随机数字表法随机分为三组:假手术组(S组),缺血再灌注组(IR组),长托宁处理组(PHC组).S组不阻断血流,IR、PHC组缺血3h,各组于再灌注4h后测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性;荧光显微镜下观察小肠细胞自噬小体;聚合酶链式反应(PCR)检测自噬相关基因Beclin1、Atg5的mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬标志蛋白LC3蛋白的表达水平.结果 IR组血清LDH、CK分别为(5 231±463)、(3 673±231),与S组比较分别增加94％、161％(P ＜0.01);PHC组血清LDH、CK分别为(2 813±587)、(1 583±131),与S组比较分别增加5％、13％(P＞0.05);与S组比较,IR组荧光显微镜下单位面积自噬小体明显增加,PHC组变化不明显;IR组Beclin1表达增加,与S组比较增加约127％(P ＜0.01),PHC组与S组比较增加约16％(P ＞0.05).IR组Atg5表达增加,与S组比较增加约67％(P ＜0.05),PHC组与S组比较增加约14％(P ＞0.05).IR组LC3表达增加,与S组比较LC3Ⅱ与LC3Ⅰ的比值分别增加约196％(P ＜0.01),PHC组与S组比较增加约18％(P ＞0.05).结论盐酸戊乙奎醚可抑制肢体缺血再灌注损伤诱发大鼠小肠组织自噬水平的增加.