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神经生长因子对颗粒细胞增殖检测方法的探讨

Effect of nerve growth factor on granulosa cell proliferation

摘要目的 为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法.方法 用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入标记,免疫荧光技术检测颗粒细胞在体外培养中的增殖情况和BrdU标记指数.结果 NGF明显促进颗粒细胞增殖,并且具有一定的时效关系.荧光显微镜下可见BrdU阳性标记的颗粒细胞,提示细胞处于增殖期.NGF组的BrdU标记指数为45.03%,明显高于对照组20.65%(P <0.01).NGF使增殖期的细胞显著增多及增殖指数明显升高.结论 该研究证实NGF能够促进颗粒细胞增殖,CCK-8分析和BrdU标记是高效、灵敏的标记腔前颗粒细胞增殖的方法,NGF促进颗粒细胞增殖与促进颗粒细胞DNA的合成有关系.

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