摘要目的 基于增强型绿色荧光蛋白(EGFP)研究中性粒细胞(PMN)对大肠杆菌的抑制作用.方法 以pEGFP-N1为模板,扩增出750 bp的EGFP基因片段,克隆到pET-20b(+)载体上,构建pET-20b(+)-EGFP并转入宿主BL21,PCR鉴定、IPTG诱导表达后的EGFP-E.coli与中性粒细胞共同培养后,测定指定时间的荧光强度,并线性拟合中性粒细胞抗菌的动力学方程.结果 成功构建重组质粒pET-20b(+)-EGFP和BL21表达增强型绿色荧光蛋白.中性粒细胞对大肠杆菌的作用时间与ln(F/F0)呈正相关(R2=0.8238).结论 基于EGFP改进传统的PMN抑菌方法.
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