microRNA-10b及靶基因HOXD10在肝癌细胞中的表达及侵袭能力的影响

Expression of miR-10b and target gene HOXD10 in liver cancer cell lines and its impact on tumor invasion

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摘要目的：探讨microRNA-10b（miR-10b）及其靶基因同源异性盒基因HOXD10在肝癌细胞中的表达及转染miR-10b对肝癌细胞侵袭性能力的影响。方法分析HOXD10基因在3种肝癌细胞株Huh7、HepG2、SMMC-7721中的基础表达量，筛选出HOXD10基础表达量高的HepG2作为后续研究对象。设计合成外源性miR-10b序列，用脂质体瞬时转染肝癌细胞株，设置miR-10b转染组、无关序列转染组（阴性对照组）和未处理组（对照组）。用RT- PCR及Western blot检测肝癌细胞转染miR-10b后HOXD10基因及蛋白表达量的变化，细胞侵袭实验研究转染miR-10b对肝癌细胞侵袭能力。结果在基因水平和Western blot分析蛋白水平HOXD10基因表达量2-ΔΔCT分别是（1.24±0.23）、（1.00±0.02），>0.05差异无统计学意义。在蛋白分析HepG2细胞灰度计算值是值分别是653.492和1968.742，蛋白水平表达降低。HOXD10基因在肝癌细胞株HepG2的表达量显著高于Huh7和SMMC-7721；miR-10b成功转染HepG2后，HOXD10基因表达水平与对照组比较无明显变化，但HOXD10蛋白表达量与对照组比较下降及侵袭性也增强。结论 miR-10b可能通过抑制靶基因HOXD10表达发挥作用，促进肝癌细胞的侵袭。