胰岛素样生长因子结合蛋白7过表达对人乳腺癌细胞系-7增殖的影响及其机制研究
Effect of IGFBP7 overexpression on proliferation of breast cancer cell line MCF-7
摘要目的:探究过表达胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)对人乳腺癌细胞系-7(MCF-7)增殖的影响及其机制。方法采用LipofectamineTM 2000将pIRES2- ZsGreen1- IGFBP7质粒或pIRES2- ZsGreen1空白质粒转染进MCF-7乳腺癌细胞,并用荧光显微镜鉴定细胞转染;实时荧光定量聚合酶链反应(Real- time PCR)对转染48 h后IGFBP7蛋白进行定量;细胞凋亡实验检测转染24、48和72 h后各组细胞增殖情况;Western bolt检测转染48 h后各组细胞(蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白)(AKT/mTOR)信号通路相关蛋白的表达。结果 Real- time PCR的检测结果提示经过IGFBP7转染的细胞IGFBP7 mRNA表达水平明显升高;细胞凋亡实验结果发现,与空白处理组和空白质粒转染组比较,IGFBP7过表达组细胞增殖能力明显降低;West-ern bolt检测结果发现,AKT蛋白的磷酸化水平明显下降,且其下游的mTOR表达明显下降(<0.05)。结论IGFBP7过表达对MCF-7乳腺癌细胞的增殖具有抑制效果,可能是通过对AKT/mTOR信号通路的抑制达到对MCF-7的抑制。
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