MicroRNA-599对静脉曲张中血管平滑肌细胞去分化的影响及其机制研究
MicroRNA-599 inhibits vascular smooth muscle cell dedifferentiation and its mechanism in varicose veins
摘要目的 研究microRNA-599(miR-599)在曲张静脉中的表达,探讨miR-599是否通过下调血小板源性生长因子B(PDGF-BB),抑制曲张静脉中血管平滑肌细胞(VSMCs)去分化.方法 收集大隐静脉移植术患者中曲张静脉和正常静脉标本,通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测42例曲张静脉组织及39例正常静脉组织中miR-599、miR-200、miR-145、miR-146b、miR-155的表达;Western blot检测两组标本中SM-actin、SM-22、SM-MCH、OPN的表达;在细胞实验中,转染miR-599mimic和miR-NC至离体培养的VSMCs中,Western blot检测VSMCs中SM-actin、SM-22、SM-MCH、OPN、PDGF-BB的表达,噻唑蓝法测细胞增殖、划痕实验观察细胞迁移,利用荧光素酶试验验证PDGF是miR-599的靶基因.结果 相比于正常静脉组织,miR-599在曲张静脉中的表达降低(F=73.012,P=0.001).两组miR-146b、miR-200、miR-30、miR-155的表达量比较,差异无统计学意义.相比于正常静脉组织,曲张静脉组织中SM-actin、SM-22、SM-MCH的表达降低(P<0.05),OPN的表达升高(F =56.414,P=0.009);在细胞实验中,相比于对照组,miR-599组VSMCs中SM-actin、SM-22、SM-MCH的表达升高(P<0.05),OPN的表达降低(F=27.353,P=0.022),细胞增殖减少(F=37.824,P=0.016),迁移减少(F=69.365,P=0.001),PDGF表达量减少(F =55.345,P=0.004).荧光素酶试验结果显示,miR-599能够降低PDGF-3'-UTR质粒的荧光素活性(F =21.429,P=0.036).结论 在曲张静脉组织中,miR-599低表达.在VSMCs中,miR-599可以通过下调PDGF-BB而抑制VSMCs去分化.
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