人肺动脉平滑肌细胞对人肺动脉内皮细胞增殖的影响
Human pulmonary arterial smooth muscle cells regulate proliferation of human pulmonary arterial endothelial cells via survivin signaling pathway under hypoxic condition
摘要目的 探讨缺氧条件下,细胞共培养体系中人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)经由Survivin信号通路调控人肺动脉内皮细胞(HPAECs)的增殖.方法 建立Transwell共培养体系将HPASMCs和HPAECs分别接种于下室和上室,根据HPASMCs是否行YM155(Survivin抑制剂)预处理进行实验分组:常氧条件下HPASMCs与HAPECs共培养对照组(N组),常氧条件下YM155(终浓度100 nmol/l)预处理HPASMCs与HPAECs共培养组(NY组),缺氧条件下HPASMCs与HAPECs共培养组(H组)和缺氧条件下YM155预处理HPASMCs与HPAECs共培养组(HY组).采用活细胞计数(CCK8)法检测各组中HPASMCs与HPAECs的增殖活性(吸光度,A值),实时定量PCR检测HPASMCs中Survivin mRNA的表达,Western blot检测HPASMCs中Survivin蛋白的表达.结果 N组HPASMCs与HPAECs增殖活性(0.561±0.007)、(0.619±0.013)与H组(0.777±0.030)、(0.875±0.021)比较,差异有统计学意义(q=16.615和21.333,p<0.05).HY组HPASMCs与HPAECs增殖活性为(0.661±0.027)、(0.723±0.025),与H组比较差异有统计学意义(q=8.923和12.667,p<0.05).共培养体系中N组HPASMCs未见mRNA和Survivin蛋白(0.017±0.001)表达,H组中HPASMCs可见mRNA(4506±849)和Survivin蛋白(0.932±0.018)表达.HY组HPASMCs mRNA和Survivin蛋白含量为(677±183)和(0.426±0.022),与H组比较差异有统计学意义(q=15.25和50.6,p<0.05).结论 缺氧导致HPASMCs和HPAECs异常增殖,缺氧条件下共培养体系中HPASMCs经由Survivin信号通路调控HPAECs的增殖.
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