二烯丙基二硫在RORα抑制人胃癌细胞上皮间质转化中的作用
Up-regulation of RORα inhibits EMT in human gastric MGC803 cells induced by diallyl disulfide
摘要目的 探讨二烯丙基二硫(DADS)是否上调维甲酸相关孤核受体α(ROR α)抑制人胃癌细胞株MGC803细胞上皮-间质转化(EMT).方法 相差显微镜观察MGC803细胞形态的改变.逆转录PCR(RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)、免疫荧光与免疫组织化学检测EMT的相关分子表达.裸鼠实验检测DADS与沉默RORα对移植瘤生长的影响.结果 相差显微镜显示,沉默RORα细胞较MGC803细胞大小与形状差异更明显.DADS作用后,细胞大小较一致,呈圆形或椭圆形,梭形细胞减少,异型性下降.RT-PCR与Western blot显示,DADS处理后较处理前各组RORαmRNA与蛋白表达上调(P<0.05).DADS作用对照组与空载体组较沉默组效果更为明显(P<0.05).RORα沉默较对照组和空载体组细胞锌指转录因子(Snail)和波形蛋白(Vimentin)mRNA与蛋白表达上调,而E-钙黏蛋白(E-cadherin) mRNA与蛋白下调(P<0.05).DADS处理后,各组Snail蛋白下调、Vimentin mRNA与蛋白下调和E-cadherin mRNA与蛋白上调(P<0.05).免疫荧光显示,沉默组细胞Snail与Vimentin阳性表达较对照组增强,而E-cadherin阳性表达减弱.DADS作用后,结果相反.裸鼠移植瘤实验显示,RORα沉默组移植瘤较对照组生长加快和体重增加(P<0.05),增殖细胞核抗原(Ki-67)、Snail、CD34及Vimentin阳性表达较对照组增加,而E-cadherin阳性降低.DADS处理各组移植瘤生长与体积减慢与减小,Ki-67、Snail、CD34与Vimentin阳性表达较对照组减弱,而E-cadherin阳性表达增强.结论 DADS通过上调RORα可体内外抑制人胃癌MGC803细胞EMT.
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