换一批
换一批摘要目的 观察XB130表达上调后人肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的变化,并探讨其作用机制.方法 Western blot及实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肝癌细胞株中XB130表达;构建过表达质粒pCMV-EGFP-XB130转染HepG2细胞,实验分为pCMV-EGFP-XB 130组(pCMV-EGFP-XB 130转染),空白对照组(EGFP转染).以免疫荧光、Western blot法及qRT-PCR法检测上调效率.Western blot法检测PI3K/Akt通路相关基因表达;采用MTT法检测转染后细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 XB130蛋白及其mRNA在肝癌细胞株Hep3B、Huh7、HepG2和MHCC97H中均有表达,在HepG2细胞株中表达量最低(F=6.342和5.424,均P=0.001).与EGFP组比较,pCMV-EGFP-XB130组中p-p21、p-p27、p-FOXO3a及Pro Capase-9蛋白表达上调(t=4.652,3.558,6.743和3.021,均P＜0.05);XB130表达上调后在72及96 h HepG2细胞增殖能力增强(t=4.752和8.542,均P=0.001);XB130表达上调后HepG2细胞凋亡率降低(t=7.467,P=0.001).结论 XB130表达上调通过PI3K/Akt信号通路促进肝细胞癌细胞增殖,抑制凋亡.
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