血液系统条件性DNMT3B基因敲除小鼠的构建及鉴定
Generation of hematopoietic system-specific DNMT3B gene conditional knockout in mouse model
摘要目的 构建可在血液系统中条件性敲除DNMT3B基因小鼠并进行鉴定,为研究DNMT3B基因的生物学功能及其在血液肿瘤疾病的作用机制提供动物模型.方法 将引进的DNMT3Bflox/flox小鼠与Mx1-Cre+小鼠进行杂交繁殖,得到基因型DNMT3Bflox/+Mx1-Cre+及DNMT3Bflox/+Mx1-Cre-两种子代,再用这两种子代杂交产生子代小鼠,通过PCR法鉴定子代小鼠的基因型;获得基因型为DNMT3Bflox/floxMx1-Cre+的小鼠,通过腹腔注射pI-pC共5次诱导DNMT3B敲除,然后用半定量PCR方法鉴定DNMT 3B基因敲除情况.结果 基因型鉴定确认在13只子鼠中有2只为DNMT3Bflox/floxMx1-Cre+,经pI-pC腹腔注射后,DNMT 3B基因通过Cre/loxP系统被成功敲除.结论 该方法成功构建可以在血液系统条件性敲除DNMT3B基因的小鼠,并进行敲除后鉴定.
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