塞来昔布联合培美曲塞对人肺腺癌A549细胞株增殖、凋亡及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的影响

Effect of Celecoxib combined with Pemetrexed on proliferation, apoptosis and PI3K/AKT signaling pathway-related proteins in human lung adenocarcinoma A549 cells

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摘要目的探讨塞来昔布(Cele)联合培美曲塞(Pem)对人肺腺癌A549细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制.方法分别采用不同浓度的Cele和Pem作用于A549细胞,48 h条件下,CCK-8法检测光密度(OD)值,计算半抑制浓度(IC50)作为后续实验的药物浓度;实验分组:对照组(加入培养液)和实验组(分别加入IC50浓度的Cele、IC50浓度的Pem、IC50浓度的Cele+Pem);Cele、Pem单独用药或者联合用药在不同时间条件下(24、36和48 h)作用于A549细胞,CCK-8法检测细胞增殖,择最佳作用时间作为后续实验的干预时间,金氏法评估两药之间的相互关系,流氏细胞仪检测细胞凋亡及周期分布,Western blotting检测AKT、p-AKT蛋白表达情况.结果与对照组比较,Cele和Pem组呈浓度依赖性抑制A549细胞的增殖,但低浓度Cele组(5μmol/L)与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).Cele IC50值为30.51μmol/L,Pem IC50值为1.33μmol/L;与对照组比较,Cele和Pem组呈时间依赖性抑制A549细胞增殖,且Cele+Pem组效果最佳.最佳干预时间为48 h,Cele与Pem联合抑制A549细胞增殖;Cele+Pem组与对照组、Cele组及Pem组比较,Cele+Pem组细胞凋亡率和G0/G1期细胞比例升高,p-AKT/GAPDH值下调(P<0.05),而AKT/GAPDH值各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 Cele与Pem联合可抑制A549细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与诱导细胞G0/G1期阻滞及抑制PI3K/AKT信号通路相关蛋白AKT活性相关.