NF-κB p65对OX-LDL处理的内皮祖细胞增殖活性的影响及机制研究

Effect of NF-кB p65 on proliferative activity of OX-LDL treated endothelial progenitor cells

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摘要目的研究核因子 κB p65(NF-кB p65)对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)处理的内皮祖细胞增殖活性的影响及机制.方法分离培养人内皮祖细胞,用OX-LDL细胞培养液培养后,分别用实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting检测细胞中NF-κBp65 mRNA及蛋白水平.用NF-κB p65 siRNA慢病毒感染内皮祖细胞,给予OX-LDL处理以后,qRT-PCR和Western blotting检测干扰效果.MTT检测内皮祖细胞的增殖活性,流式细胞术检测内皮祖细胞的凋亡变化,Western blotting检测细胞中活化的Caspase-3、Caspase-9蛋白水平,用比色法检测细胞裂解液中的超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.结果 OX-LDL处理可以诱导内皮祖细胞中NF-κB p65表达上调.NF-κB p65 siRNA慢病毒可以下调OX-LDL条件下内皮祖细胞中NF-кBp65的表达水平.OX-LDL处理后的内皮祖细胞的增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中活化的Caspase-3、Caspase-9蛋白水平也升高,细胞中SOD活性降低,MDA含量升高(P<0.05).敲低NF-κB p65后的内皮祖细胞经OX-LDL诱导后,细胞增殖活性有所升高,细胞凋亡率降低,细胞中活化的Caspase-3、Caspase-9蛋白水平降低,SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05).结论敲低NF-κB p65能够降低OX-LDL诱导的氧化应激及细胞凋亡,提高内皮祖细胞增殖活性.