小分子化合物诱导骨髓间充质干细胞类神经分化的实验研究
Experimental study of neural differentiation induced by small molecular compounds in bone marrow mesenchymal stem cells
摘要目的 探讨小分子化合物组合(Forskolin、SB431542、DMH1、CHIR99021)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)类神经分化的可行性.方法 全骨髓贴壁法分离大鼠BMSCs,流式细胞仪鉴定细胞.培养细胞至第3代,以含有Forskolin的神经元培养基预诱导1?d,再以含有Forskolin、SB431542、DMH1、CHIR99021的神经元培养基正式诱导3?d.以神经元培养基为对照组.通过观察细胞形态、免疫荧光检测、Western blotting技术对类神经分化细胞进行鉴定.结果 大鼠BMSCs以梭形细胞为主,可见长短不一的突起;经流式细胞仪鉴定,CD90、CD105表达呈阳性,而CD34和CD45表达呈阴性.诱导后,细胞有神经样形态改变,免疫荧光检测到神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(Nestin)阳性表达,诱导3?d后Western blotting显示实验诱导组与对照组比较,NSE、Nestin和SOX1表达增多(P?<0.05).结论 小分子化合物组合(Forskolin、SB431542、DMH1、CHIR99021)可诱导BMSCs类神经分化.
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