lncRNA SNHG6通过microRNA-26b-5p对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用机制研究

The effect of lncRNA SNHG6 on proliferation, migration and invasion of triple-negative breast cancer cells by microRNA-26b-5p

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摘要目的探究lncRNA SNHG6通过microRNA-26b-5p(miR-26b-5p)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、迁移、侵袭的作用机制.方法体外培养人TNBC细胞系MDA-MB-231细胞,培养后分组转染.设置对照组(空载质粒转染),SNHG6敲减组(si-SNHG6慢病毒载体转染)、miR-26b-5p抑制组(空载质粒+miR-26b-5p-inhibitor转染)及共转染组(si-SNHG6慢病毒载体+miR-26b-5p-inhibitor转染).实时荧光定量聚合酶链反应检测SNHG6及miR-26b-5p的表达,分别进行CCK-8实验、划痕实验及Transwell实验检测MDA-MB-231细胞增殖、迁移及侵袭能力,采用双荧光素酶报告实验检测SNHG6与miR-26b-5p的靶向作用.结果与对照组比较,SNHG6敲减组SNHG6 mRNA表达下调(P<0.05),miR-26b-5p mRNA表达上调(P<0.05);与对照组比较,miR-26b-5p抑制组SNHG6 mRNA表达上调(P<0.05),miR-26b-5p mRNA表达下调(P<0.05);与SNHG6敲减组比较,miR-26b-5p抑制组和共转染组SNHG6 mRNA表达上调(P<0.05),miR-26b-5p mRNA表达下调(P<0.05);与miR-26b-5p抑制组比较,共转染组SNHG6 mRNA表达下调(P<0.05),miR-26b-5p mRNA表达上调(P<0.05).对照组、SNHG6敲减组、miR-26b-5p抑制组、共转染组24 h、48 h、72 h的OD值比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:①不同时间点OD值有差异(F=52.481,P=0.000).②4组OD值有差异(F=50.336,P=0.000),与对照组比较,SNHG6敲减组及共转染组24 h、48 h及72 h的OD值降低(P<0.05),miR-26b-5p抑制组24 h、48 h及72 h的OD值升高(P<0.05);与SNHG6敲减组比较,miR-26b-5p抑制组和共转染组24 h、48 h及72 h的OD值升高(P<0.05);与miR-26b-5p抑制组比较,共转染组OD值降低(P<0.05).③4组OD值变化趋势有差异(F=20.109,P=0.000).与对照组比较,SNHG6敲减组和共转染组划痕愈合率降低,侵袭细胞数减少(P<0.05),miR-26b-5p抑制组划痕愈合率升高,侵袭细胞数增加(P<0.05);与SNHG6敲减组比较,miR-26b-5p抑制组和共转染组划痕愈合率升高,侵袭细胞数增加(P<0.05);与miR-26b-5p抑制组比较,共转染组划痕愈合率降低,侵袭细胞数减少(P<0.05).且SNHG6与miR-26b-5p基因序列上存在结合位点.结论敲减SNHG6通过靶向上调MDA-MB-231细胞中miR-26b-5p的表达,抑制TNBC增殖、迁移及侵袭.