参杞强精颗粒对H2O2诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激损伤的作用
Effects of Shenqi Qiangjing granules against oxidative stress injury by H2O2 in TM3 cells
摘要目的 探讨参杞强精颗粒对过氧化氢H2O2诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激损伤的作用.方法 以小鼠睾丸间质细胞为细胞模型,用MTT法检测参杞强精颗粒对正常TM3的细胞毒性作用;以500 μmol/L H2O2诱导损伤TM3细胞4 h后复制氧化应激损伤模型,采用CCK-8法检测不同浓度参杞强精颗粒对H2O2损伤TM3细胞增殖活力的影响;分别给予参杞强精颗粒(0.4、0.8和1.6 mg/mL)干预处理24 h后,用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中睾酮分泌水平、一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量及谷胱甘肽-S转移酶(GST)的活性;同时检测细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(TAOC)的含量;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测睾酮合成酶类固醇合成快速调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、17β-羟基固醇脱氢酶(17β-HSD)mRNA表达.结果 参杞强精颗粒在浓度为0.05~2.50 mg/mL时对正常TM3细胞无毒性作用.与H2O2损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高TM3细胞增殖活率(P<0.05).与H2O2模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组提高细胞上清液中睾酮水平和NO含量,增加GST活性,降低LDH和8-OHdG含量(P<0.05).与H2O2 损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组降低细胞内ROS、MDA含量,同时增强CAT、SOD和TAOC的活性(P<0.05).与H2O2 模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高睾酮合成酶StAR、P450scc、17β-HSD mRNA相对表达量(P<0.05).结论 参杞强精颗粒对H2O2诱导睾丸间质细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能通过清除氧自由基、抗氧化应激损伤及促进睾酮合成有关.
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