鼠肌肉转录调节因子MyoD基因真核表达载体的构建
CONSTRUCTION OF EUKARYOTIC EXPRESSION PLASMID FOR MOUSE MYOGENIC REGULATORY FACTOR MYOD GENE/
摘要目的构建肌肉转录调节因子MyoD基因真核表达载体,为深入研究MyoD在肌肉修复中的分子调节机制,探讨其在肌肉损伤方面的生物学行为,为临床应用提供物质基础.方法含MyoD cDNA的质粒PEMMBC2 β5于大肠杆菌E.Coli DH5a内扩增;提取及纯化PEMMBC2 β5质粒;经DNA序列分析含MyoD cDNA;限制性酶切MyoD cDNA片段,连接酶连接到真核表达质粒pcDNA3-neo内,克隆出真核表达载体 pcDNA3/MyoD.结果提取及纯化的PEMMBC2 β5质粒含有大小正确的MyoD cDNA碱基片段,其碱基序列为编码目的基因的正确序列,凝胶电泳结果证明已将此片段正确地克隆到pcDNA3/MyoD内.结论成功的构建了MyoD基因的真核表达质粒 pcDNA3/MyoD.
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