换一批猪源肠球菌中氟苯尼考耐药性调查及fexA基因环境研究
Study on Florfenicol Resistance and fexA Genetic Environment in Enterococcus from Swine
摘要本研究旨在调查猪场中肠球菌对氟苯尼考的耐药性,检测氟苯尼考耐药基因,并测定肠球菌中氟苯尼考耐药基因fexA的基因环境,从而分析其可能的传播机理.以四川某猪场分离鉴定的50株肠球菌为研究材料,开展分离株对氟苯尼考的药物敏感性试验.运用PCR技术检测分离株中氟苯尼考耐药基因cfr、fexB、fexA、floR和estDL 136.运用热不对称性PCR(TAIL-PCR)技术获得fexA基因周围序列信息,分析其基因环境.运用反向PCR技术验证序列中环化结构的存在,同时运用交叉PCR技术检测20株猪源肠球菌fexA基因的基因环境.结果显示,在分离出的50株肠球菌中,有34株对氟苯尼考耐药(MIC≥16 mg/L),耐药率为68％.PCR结果显示,20株含有fexA基因,28株含有fexB基因,14株同时含有这两种基因.TAIL-PCR和测序结果显示,分离株DKC5中fexA基因存在于12 945 bp的Tn554转座子中.Tn554转座子可形成环化结构,其中的重复序列可形成含有2 395 bp的环化结构.本试验结果表明,猪源肠球菌对氟苯尼考耐药率较高,主要由fexA和fexB基因介导,fexA基因存在于Tn554结构中.预测fexA基因是经两次插入整合后进入DKC5分离株基因组序列的,这为fexA基因的水平传播提供了遗传依据.
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