换一批聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用
Application of Silver Staining of Polyacrylamide Gels in Semi-Quantitative RT-PCR
摘要目的:探讨聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用.方法:提取正常组大鼠和链脲佐菌素致糖尿病模型组大鼠心肌组织总RNA,逆转录得到cDNA第一链,以此为模板进行PCR扩增,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA银染技术分析不同循环数及模板量与PCR产物量间的关系.结果:PCR扩增反应在第20～25个循环,起始模板量为0.8～2.4μg时,PCR产物量与起始模板量呈现较好的线性关系.结论:通过控制起始模板量,减少PCR循环数使目的基因的扩增处于PCR扩增指数期,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DM银染技术,可以通过比较PCR扩增产物量的变化以分析目的基因表达水平的差异.
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分类号
Q503（生物化学一般性问题）
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1000-5048.2004.02.019
发布时间
2004-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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