万古霉素糖基转移酶GtfE的异源表达与体外活性检测
Heterologous expression and in vitro activity of vancomycin glycosyltransferase GtfE
摘要为了得到具有糖基转移酶活性的重组蛋白,从万古霉素产生菌总DNA中克隆万古霉素糖基转移酶基因gtfE,连入pET-37b构建表达质粒并转入大肠杆菌BL21(DE3)表达,体外测定纯化后的重组蛋白糖基转移酶活性,用HPLC和ESI-MS检测反应产物.结果表明,重组蛋白具有预期活性,可以催化尿苷二磷酸葡萄糖与万古霉素苷元的糖基化反应.本研究为获得糖基多样性的万古霉素奠定理论基础.
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