猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5抗体检测ELISA在中和抗体评估中潜在应用的研究
The potential use of a developed ELISA based on recombinant PRRSV GP5 in the evaluation for neutralizing antibodies specific to PRRSV
摘要为评估猪群血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒-(PRRSV)中和抗体水平,本研究以原核表达的重组HP-PRRSV GP5蛋白为包被抗原,通过对反应条件进行优化,建立了检测GP5抗体的间接ELISA(rGP5-ELISA).结果显示该方法与猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、细小病毒、日本乙型脑炎病毒阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性.重复性试验结果显示,组内组间变异系数均小于5.3%.应用建立的rGP5-ELISA方法和IDEXX-ELISA对288份临床血清样品进行检测,结果显示两种方法具有较低的相关性(R=0.831).中和试验(SN)结果显示,rGP5-ELISA检出阳性血清的中和效价显著高于IDEXX-ELISA (p<0.01).Western blot复检rGP5-ELISA检测呈阴性的65份猪血清样品,其中58份呈阴性、7份为阳性;而IDEXX-ELISA检测则该65份血清全部呈阳性.对比SN和western blot试验,rGP5-ELISA比商品化IDEXX-ELISA具有更高的SN抗体符合率,因而其检测结果能够更好地反映猪群血清中和抗体水平.本研究建立的方法可以用于大规模猪群PRRSV中和抗体水平评估,并为PRRS流行病学调查提供了技术支持.
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