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染色质重塑因子1在肺癌中过表达并促进肺癌增殖能力

Remodeling and Spacing Factor 1 is Overexpressed and Promotes the Tumor Cell Proliferation in Lung Cancer

摘要目的 检测染色质重塑因子1(Rsf-1)对肺癌增殖能力的影响,初步探讨Rsf-1促进肺癌增殖的分子机制.方法 应用Western blot方法筛选Rsf-1高表达人肺癌H1299、H460细胞系,通过小干扰RNA (siRNA)方法干扰内源性Rsf-1表达,并检测干扰效率.应用集落形成、流式细胞术检测Rsf-1干扰前后肺癌细胞增殖能力的变化.应用Western blot检测干扰内源性Rsf-1表达前后肺癌细胞中增殖相关因子的变化.结果 Western blot结果显示:肺癌细胞中Rsf-1蛋白表达水平明显高于正常支气管上皮HBE细胞系,其中H1299、H460细胞中存在非常明显的Rsf-1高表达.转染Rsf-1特异的siRNA于高表达Rsf-1的H1299和H460细胞后,其克隆形成明显少于对照组(H1299细胞中对照组和干扰组分别为123±15和83±9; H460细胞中对照组和干扰组分别为218±18和112±17)(P<0.05).流式细胞术结果显示:干扰内源性Rsf-1表达后,H1299和H460细胞中Gt期细胞比例增多(H1299细胞中对照组和干扰组分别为56%±5%和71%±7%;H460细胞中对照组和干扰组分别为53%±4%和70%±6%),S期细胞比例减少(H1299细胞中对照组和干扰组分别为17%±2%和11%±5%;H460细胞中对照组和干扰组分别为19%±2%和10%±5%).细胞周期相关蛋白检测结果:干扰内源性Rsf-1表达后,H1299和H460细胞中cyclinD1和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(pERK)水平明显下调.干扰Rsf-1在下调H1299和H460细胞pERK蛋白表达的作用结果与应用细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂U0126相似.结论 Rsf-1可通过cyclinD1/ERK相关通路促进肺癌细胞的增殖.

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中国医科大学学报

中国医科大学学报

2014年43卷9期

821-825页

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