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lncRNA ENST00000655811.1在胸腺瘤中的表达及对细胞增殖、迁移和凋亡能力的影响

Expression of lncRNA ENST00000655811.1 in thymoma and its effect on proliferation,migration and capacity for apoptosis

摘要目的 检测lncRNA ENST00000655811.1在胸腺瘤组织中的表达水平,探讨其对细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制.方法 收集2例胸腺瘤组织和癌旁组织,高通量测序技术检测差异表达lncRNA,以实时定量荧光聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qPCR)对上调表达最显著的10个lncRNA进行验证;收集15例胸腺瘤组织、癌旁组织和外周血样本,qPCR检测lncRNA ENST00000655811.1的相对表达量,分析其与临床指标相关性;构建lncRNA ENST00000655811.1过表达质粒以及特异性敲降siRNA转染HEK293、MTEC1细胞,分别使用CCK8、EdU、划痕、transwell、蛋白印迹法和细胞流式实验分析lncRNA ENST00000655811.1对细胞增殖、迁移和凋亡的作用;最后运用生物信息学软件预测lncRNA ENST00000655811.1的靶标miRNA,并以双荧光素酶报告基因实验验证其具体结合位点.结果 高通量测序筛选出6436个差异表达lncRNA(上调2404个,下调4032个).其中上调最为显著的ln-cRNA ENST00000655811.1在胸腺瘤组织的表达水平明显高于癌旁组织[0.024(0.009,0.058)vs.0.005(0.002,0.030),P=0.0266].与正常人外周血相比,lncRNA ENST00000655811.1在胸腺瘤患者外周血中表达显著增加[0.025(0.012,0.133)vs.0.002(0.001,0.006),P<0.0001].胸腺瘤组织中lncRNA ENST00000655811.1表达水平与胸腺瘤分期、病理学分型及是否伴有重症肌无力无明显相关性.在HEK293、MTEC1细胞中,lncRNA ENST00000655811.1显著促进细胞增殖和迁移,并抑制其凋亡.lncRNA ENST00000655811.1通过其951-972碱基位点与miR-619-5p特异性结合.结论

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作者 刘晓乐 [1] 黄睿 [2] 邹丽辉 [3] 学术成果认领
作者单位 北京大学第五临床医学院,北京 100730 [1] 北京医院国家老年医学中心 国家卫生健康委北京老年医学研究所国家卫生健康委老年医学重点实验室中国医学科学院老年医学研究院,北京 100730 [2] 北京大学第五临床医学院,北京 100730;北京医院国家老年医学中心 国家卫生健康委北京老年医学研究所国家卫生健康委老年医学重点实验室中国医学科学院老年医学研究院,北京 100730 [3]
栏目名称
DOI 10.12037/YXQY.2022.12-08
发布时间 2022-12-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家自然科学基金(81871107)
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