换一批以FOXP3为靶点的免疫抑制剂药物筛选模型的建立
Screening model for immuning inhibitors as target for transcription factor FOXP3
摘要目的 构建以FOXP3为靶点的免疫抑制剂筛选模型,用于筛选免疫抑制剂.方法 以人类基因组DNA为模板,通过PCR扩增人类FOXP3基因启动子,将扩增的启动子DNA片段克隆至pGeneBLAzer-TOPO载体,以PCR方法确定插入片段方向,选取有正向片段的质粒克隆进行测序鉴定,用Lipofectine2000转染Jurkat细胞株,经G418抗性筛选获得阳性细胞克隆,通过PCR扩增鉴定阳性细胞克隆基因组中整合有FOXP3启动子/pGeneBLAzer-TOPO载体.以阳性对照前列腺素-2(PGE2)和PMA/Ionophore刺激细胞,探讨FOXP3启动子对下游报告子β-内酰胺酶活性的影响,并筛选了研究所内约2500余种天然产物.结果 通过PCR成功扩增人类FOXP3基因启动子全长区域,构建了FOXP3启动子/pGeneBLAzer-TOPO载体,以PCR方法鉴定稳定转染细胞株Jurkat细胞基因组中整合有FOXP3启动了/pGeneBLAzer-TOPO载体,探讨了阳性对照PGE2和PMA/Ionophore对FOXP3基因启动子活性的影响,建立了以FOXP3为靶点的免疫抑制剂药物筛选模型,筛选了研究所2500余种天然产物,获得4个对FOXP3基因启动子具有上调作用的天然产物.结论 建立了以FOXP3为靶点的免疫抑制剂筛选模型.
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医学主题词
免疫抑制剂(Immunosuppressive Agents)药物评价, 临床前(Drug Evaluation, Preclinical)细胞(Cells)淋巴细胞(Lymphocytes)性(Sex)
分类号
R9（药学）
DOI
10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2011.01.002
发布时间
2011-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30772578）
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