摘要目的:基于肠道黏膜屏障功能和含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)相关炎症反应,探讨汉黄芩素对小鼠溃疡性结肠炎的保护作用及分子机制.方法:将32只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、汉黄芩素组(100mg/kg)和美沙拉嗪组(50mg/kg),每组8只.实验第1～7天,正常对照组小鼠自由饮水饮食,模型组、汉黄芩素组和美沙拉嗪组小鼠饮用3％DSS水溶液,同时汉黄芩素组和美沙拉嗪组小鼠分别腹腔注射和灌胃相应的药物,正常对照组和模型组小鼠腹腔注射等量的0.9％氯化钠溶液;每日记录小鼠体质量、饮食饮水、大便性状和活动状态等一般情况.第7天实验结束后12 h,动物取材进行实验检测.同时,分别采用THP-1来源的巨噬细胞和Caco-2细胞进行肠道黏膜屏障模型体外实验,评价汉黄芩素的作用机制.绘制不同组别小鼠体质量变化曲线,记录结肠长度,统计疾病活跃指数(DAI)评分;进行小鼠结肠组织HE染色,F4/80和Occludin免疫组化染色;免疫荧光检测小鼠结肠组织Z0-1和NLRP3表达,Caco-2体外模型ZO-1和Occludin表达;qPCR检测小鼠结肠组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1 β(IL-1 β)、NLRP3、凋亡相关斑点(ASC)、紧密连接组分闭合蛋白(Occludin)mRNA水平,体外巨噬细胞TNF-α、IL-1 β、NLRP3、ASC mRNA水平,体外Caco-2模型TNF-α、IL-1β、Occludin mRNA水平;ELISA检测巨噬细胞体外实验上清液中TNF-α和IL-1 β水平.结果:汉黄芩素可显著缓解UC小鼠体质量下降(P＜0.01),增加结肠长度(P＜0.05),降低DAI评分(P＜0.05);模型组小鼠结肠组织中上皮黏膜结构部分缺失,腺体的排列紊乱,可见炎症细胞浸润和巨噬细胞浸润,汉黄芩素可明显改善上述情况;汉黄芩素可以抑制小鼠结肠组织中促炎细胞因子TNF-α mRNA的表达(P＜0.01),减少NLRP3和接头蛋白ASC及其下游促炎因子IL-1 β mRNA水平(P＜0.01);抑制小鼠结肠组织中NLRP3表达,增加紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达(P＜0.01),增加Occludin mRNA的水平(P＜0.01);汉黄芩素可有效降低炎症状态下巨噬细胞分泌的TNF-α水平(P＜0.01),抑制NLRP3相关炎症反应(P＜0.05);汉黄芩素可有效抑制体外肠道黏膜屏障模型TNF-α和IL-1β mRNA水平(P＜0.01,P＜0.05),增加紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达(P＜0.01),提高Occludin mRNA的水平(P＜0.01).结论:汉黄芩素对溃疡性结肠炎有治疗作用,可保护肠道黏膜屏障功能,抑制结肠NLRP3相关炎症反应.