益气温阳护卫汤含药血清对体外Th17/Treg细胞失衡与RORγ、Foxp3的影响
Effects of Yiqi Wenyang Huwei Decoction medicated serum on Th17/Treg cell imbalance in vitro and RORγ and Foxp3
摘要目的:研究益气温阳护卫汤含药血清对体外辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞失衡与维甲酸相关孤核受体γ(RORγ)、特异性叉头状转录因子3(Foxp3)的影响.方法:制备益气温阳护卫汤含药血清,CD4+T细胞进行原代分离、培养、鉴定.构建体外Th17/Treg细胞失衡模型:将细胞分为对照组、模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组,除对照组外,其余组中分别加入等量转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6、IL-23溶液,诱导CD4+T细胞向Th17细胞分化.给予相应的含药血清干预处理48 h后,采用流式细胞术检测各组Th17和Treg细胞比例.RT-PCR、Western Blot分别检测ROR γ、Foxp3 mRNA和蛋白表达水平.结果:与对照组比较,模型组Th17细胞比例、Th17/Treg比例均显著上升(P<0.01),Treg细胞比例显著下降(P<0.01);与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组Th17细胞比例、Th17/Treg比例均显著降低(P<0.01,P<0.05),Treg细胞比例显著上升(P<0.01,P<0.05).与对照组比较,模型组RORγ mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05,P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组RORγ mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.05),Foxp3 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05,P<0.01).结论:益气温阳护卫汤含药血清能有效改善Th17/Treg细胞体外失衡,其机制可能与调节特异性转录因子ROR-γ、Foxp3的表达相关.
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