换一批摘要目的:克隆人T细胞受体(TCR)ζ链基因,运用昆虫杆状病毒系统表达该蛋白.方法:用RT-PCR从人外周血单个核细胞(PBMC)中克隆TCRζ链cDNA,构建到昆虫杆状病毒系统专用的Transfer载体中,并与杆状病毒共转染昆虫sf9细胞.用SDS-PAGE电泳和用小鼠抗人ζ链蛋白的单抗在流式细胞仪中鉴定重组蛋白的表达.结果:克隆的人TCRζ链cDNA插入昆虫杆状病毒载体,并在昆虫sf9细胞中特异地表达了蛋白.表达量约为细胞裂解上清液总蛋白的11%.经SDS-PAGE分析,其分子量大小与预期的重组ζ链蛋白一致.用胞内标记流式细胞仪检测证实,转染重组杆状病毒的昆虫细胞含有人的ζ链蛋白.结论:从人PBMC中成功克隆了T细胞受体ζ链的基因,并在昆虫细胞中获得高效表达.用生物工程技术获得TCRζ链蛋白有利于深入研究其生物学功能.
更多相关知识
分类号
R392（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.3872/j.issn.1007-385X.2003.02.009
发布时间
2003-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
- 浏览141
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
