丹蒌片调控心肌细胞钙超载的变化及其信号分子机制
Regulation of Calcium Overload in Cardiac Myocytes by Danlou Tablets and Its Signaling Molecular Mechanism
摘要目的 通过构建H9c2心肌细胞缺氧模型,观察丹蒌片对心肌缺血损伤及心肌细胞钙超载的影响,并探讨其作用机制.方法 取对数生长期的大鼠H9c2心肌细胞,采用加入连二亚硫酸钠(Na2S204)的方法建立心肌细胞缺氧损伤模型,通过外源性给予丹蒌片含药血清,采用细胞形态学观察法,MTT法检测细胞活性,采用激光共聚焦法检测各组心肌细胞内游离Ca2+浓度,采用蛋白免疫印迹技术检测钙超载磷酸化钙调蛋白依赖性激酶(p-CaMKⅡ)、钙调蛋白激酶(CaMK Ⅱ)的表达.结果 通过细胞形态观察及MTT量效实验,确定采用5 mmoFL Na2SO4缺氧处理2h以建立稳定的心肌细胞缺氧损伤模型.与对照组比较,模型组心肌细胞内游离Ca2+水平显著升高,P-CaMK Ⅱ表达增加;与模型比较,抑制剂组及丹蒌片组心肌细胞内游离Ca2+水平均显著降低,P-CaMK Ⅱ表达降低(均P<0.05或P< 0.01).结论 丹蒌片对心肌缺血损伤的保护作用可能与其减少外钙内流、降低内钙释放,调节P-CaMKⅡ表达有关.
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