换一批刘氏正骨方对BMSCs成骨分化中Wnt信号通路及Sclerostin基因的影响
Effect of Liu's Zhenggu-Fang on Wnt Signaling Pathway in Osteogenic Differentiationof Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells
摘要目的 探究刘氏正骨方对骨髓间充质干细胞成骨分化中Wnt信号通路的影响.方法 使用刘氏正骨方含药血清或BMP-2对骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行28 d成骨诱导后,检测BMSCs的细胞活性、ALP活性及细胞矿化情况;采用RT-PCR和Western blotting法检测细胞中Co11A2、OCN、OPN和Sclerostin基因表达情况.使用含2.5％、5％、10％中药血清对BMSCs进行14d体外干预,检测Wnt信号通路关键因子LRP5、Sclerostin及成骨关键转录因子Runx2的表达情况.结果 1)中药组和BMP-2组中BMSCs中ALP活性及细胞矿化现象明显强于对照组,且中药组明显高于BMP-2组(P＜0.05);Co11A2、OCN、OPN的表达也呈现相同趋势改变(P＜0.05),但Sclerostin基因呈现明显表达下调(P＜ 0.05).2)高浓度中药血清可上调LRP5和Runx2表达(P＜0.05),下调Sclerostin基因表达(P＜ 0.05).结论 刘氏正骨方可以促进BMSCs体外成骨分化,其作用机制可能与下调Sclerostin基因表达、激活Wnt信号通路有关.
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