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基于Nrf2调控氧化应激研究麦味养肺汤对肺纤维化小鼠的保护作用及机制

Protective effect and mechanism of Maiwei Yangfei Decoction on pulmonary fibrosis mice based on Nrf2 regulation of oxidative stress

摘要探讨麦味养肺汤(Maiwei Yangfei Decoction,MWYF)对肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)小鼠的作用及其机制.制备MWYF水煎液,超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测其主要成分.雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组以及MWYF低(MWYF-L)、中(MWYF-M)、高(MWYF-H)剂量组和吡非尼酮(PFD)组,每组 10 只.除对照组外,其余各组用博莱霉素(bleomycin,BLM)气管滴注法构建肺纤维化模型,次日起给予生理盐水或MWYF或PFD灌胃处理.每日观察小鼠饮水饮食、行动、毛发;苏木精-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色和CT观察肺组织病理改变;碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)水平;免疫组织化学法观察Ⅲ型胶原(COL3)、纤连蛋白(fibronectin)表达情况;反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原α1(COL1α1)、COL3、波形蛋白(vimentin)mRNA表达水平;试剂盒检测肺组织和血清中氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA);免疫荧光检测核因子E2 相关因子2(Nrf2)蛋白入核情况;蛋白质免疫印迹法和RT-qPCR检测肺组织中Nrf2、过氧化氢酶(CAT)、血红素加氧酶1(HO-1)蛋白及mRNA表达水平.UPLC-MS/MS共检测出 12 种化学成分.动物实验显示,MWYF可以改善PF小鼠肺泡炎症、胶原沉积及纤维化,增加小鼠体质量,下调肺组织中HYP、α-SMA、COL1α1、COL3、fibronectin、vimentin等纤维化指标的表达.此外,MWYF可以提高PF小鼠肺组织和血清中SOD活力,上调Nrf2 表达水平并促进其向细胞核内转移,上调下游抗氧化靶基因CAT、HO-1 水平,进而减少脂质代谢产物MDA的积累.综上,MWYF能够显著改善PF小鼠肺组织病理损伤和纤维化,其机制可能与激活Nrf2 通路调控氧化应激有关.

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2023年48卷24期

6682-6692页

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