换一批p14ARF基因抑制喉癌细胞生长及其对内源性p53表达的影响
Effect of p14ARF gene on cell growth of human laryngeal tumor cells and expression of endogenous p53 protein
摘要目的探讨p14ARF对喉癌细胞生长的抑制作用及其对内源性p53表达的影响，为喉癌致癌的分子机理和基因治疗提供理论基础。方法采用基因转染技术，将全长野生型p14ARF互补DNA(complementary DNA，cDNA)转染到人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞中，利用流式细胞仪、聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR)和Western-Blotting等方法研究其对细胞周期、内源性野生型p53表达的影响。结果转染p14ARF基因的Hep-2细胞的生长受到明显抑制，其克隆形成能力为转染空载体的57％。细胞分析表明，转染p14ARFcDNA 48 h后，处在G0-G1和G2-M期的细胞皆增加了1倍。同时 Western-Blotting分析结果表明，内源性野生型p53表达明显上升。结论 p14ARF基因能上调Hep-2细胞中内源性野生型p53的表达并阻滞细胞于G0-G1和G2-M期，从而抑制其生长。
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