乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因的筛选-论文-万方医学网

乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因的筛选

Screening of the genes of hepatitis B virus PreS2 interacting proteins

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摘要：

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因.方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,PCR从中扩增出目的片段并测序,进行生物信息学分析.结果成功克隆出HBVPreS2基因并在酵母细胞中表达,配合后选出既能在4缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基又能在铺有X-α-半乳糖(X-α-gal)的4缺培养基上生长并变成蓝色的真阳性菌落26个,其中含金属硫蛋白A2基因的菌落有12个,细胞色素C氧化酶Ⅱ有1个,细胞色素P450 IVF亚基2个,细胞色素C氧化酶Ⅳ亚基同功酶1有2个,人血白蛋白3个,Na+-K+ATP酶β 1亚基1个,前清蛋白2个,植物血凝素半乳糖苷结合亚基1个,未知基因2个.结论成功克隆出HBV PreS2蛋白的结合蛋白,为进一步研究HBV PreS2的作用提供了新线索.

作者：陆荫英 ^[1] 李克 ^[1] 王琳 ^[1] 刘妍 ^[1] 王业东 ^[1] 成军 ^[1] 张玲霞 ^[1]

作者单位： 100039,北京,中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心,全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 ^[1]

期刊：《中华肝脏病杂志》2003年11卷1期 8-10页 MEDLINEISTICPKUCSCD

关键词：肝炎病毒,乙型基因前S2蛋白

主题词：蛋白(Egg White)基因(Genes)乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus)细胞(Cells)肝炎病毒(Hepatitis Viruses)

分类号： R511

栏目名称： 病毒性肝炎

DOI： 10.3760/j.issn:1007-3418.2003.01.002

发布时间： 2004-01-08

基金项目：

国家自然科学基金

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