结核分支杆菌Ag85 B分泌蛋白基因疫苗的构建和免疫原性的研究
Construction and immunogenicity of DNA vaccine encoding secreted form of Ag85B protein of
摘要目的构建编码结核分支杆菌(MTB)Ag85B分泌蛋白的重组真核表达质粒,并研究其免疫原性.方法采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分支杆菌H37Ra基因组DNA中扩增出Ag85B分泌蛋白基因,用HindⅢ和EcoRⅠ消化后,与同样酶消化的pcDNA3连接,转化大肠杆菌JM109,阳性克隆用酶切鉴定;重组表达质粒肌注免疫小鼠4周后,分别用dot blotting和ELISA方法检测抗体的产生和滴度.结果酶切鉴定重组表达质粒pTB30s构建成功;dot blotting检测免疫小鼠血清抗Ag85B特异性抗体阳性,ELJSA检测抗体几何平均滴度为1:120.结论应进一步研究pTB30s刺激机体的细胞免疫应答,以用于结核病(TB)的防治研究.
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