摘要目的 体外培养铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA),观察低浓度红霉素对铜绿假单胞菌蹭行运动(twitching motility)的影响.方法 将铜绿假单胞菌ATCC1244菌株接种于3组不同浓度红霉素(2.5 mg/L、0.5 mg/L、0.25 mg/L)的细菌培养基中,同时接种于未加红霉素的对照培养基中,采用肉眼观察、免疫荧光显微镜检查、免疫印迹实验、点杂交实验、电镜观察等方法观察铜绿假单胞菌蹭行运动的变化及鉴别其蹭行运动的分子组成.结果 经过18~36 h的孵育,LB平板上不同浓度的红霉素对PA蹭行运动有抑制作用,细菌光晕(halarion)直径与药物浓度呈反比;18 h时细菌的平均光晕直径2.5 mg/L组为(0.48±0.14)cm,0.5 mg/L组为(0.64±0.20)cm,0.25 mg/L组为(0.95±0.18)cm,对照组为(1.40±0.21)cm,组间比较差异有统计学意义(F=123.15,P<0.01);24 h时2.5 mg/L组为(0.67±0.12)cm,0.5 mg/L组为(0.82±0.23)cm,0.25 mg/L组为(1.18±0.24)cm,对照组为(1.58±0.28)cm,组间比较差异有统计学意义(F=76.37,P<0.01);36 h时2.5 mg/L组为(0.91±0.17)cm,0.5 mg/L组为(1.04±0.32)cm,0.25 mg/L组为(1.49±0.31)cm,对照组为(2.07±0.38)cm,组间比较差异有统计学意义(F=54.75,P<0.01).免疫荧光显微镜观察结果可见细菌菌体一端呈簇状突起,为Ⅳ型菌毛的位置所在,簇状突起的多少与药物浓度呈反比.免疫印迹实验结果显示,随着药物浓度的减少,Ⅳ型菌毛的主要成分PilA蛋白表达增加.点杂交实验结果显示在蹭行运动中起作用的PilA蛋白主要表达在光晕的最外周,但组间未见明显区别.电镜下可见红霉素作用后PA菌体一端的Ⅳ型菌毛较对照组减少,部分脱离菌体.结论 低浓度红霉素对PA的蹭行运动有抑制作用,且与红霉素浓度呈正比.
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