摘要目的 应用小鼠慢性支气管哮喘(简称哮喘)模型,观察褪黑素对慢性哮喘小鼠肺组织中胶原沉积的影响及其机制.方法 96只SPF级雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分为5组.对照组(21只)腹腔注射生理盐水;哮喘组(22只)腹腔注射生理盐水;褪黑素组(23只)腹腔注射褪黑素;地塞米松组(23只)腹腔注射地塞米松;褪黑素拮抗组(7只)腹腔注射褪黑素拮抗剂2-苯基-N-乙酰色胺.根据实验要求每组采用卵白蛋白致敏并反复雾化吸入2、4、8周时再分为2、4、8周亚组.对照组(每组均为7只);哮喘组(分别为7、7、8只);褪黑素组(分别为7、8、8只);地塞米松组(分别为7、8、8只);而褪黑素拮抗组只做2周组(7只).实验造成慢性哮喘模型.用Masson三原色法染胶原纤维;用免疫组化方法标记蛋白;用MetaMorph软件测量单位长度基底膜周径上的胶原面积(Wcol/Pbm)和单位面积上基质金属蛋白酶9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)免疫组化阳性面积(PA/UA);用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肺组织相应蛋白mRNA水平.结果 褪黑素组2、4、8周Wcol/Pbm分别为(11.8±1.3)、(12.3±1.1)、(12.7±1.4)μm2/μm,哮喘2、4、8周组分别为(14.5±1.5)、(15.8±1.8)、(16.2±1.4)μm2/μm,两组比较差异有统计学意义(td值分别为3.89、5.96、5.50,P均＜0.01);褪黑素组2、4、8周MMP-9的PA/UA像素分别为(9.7±4.9)、(14.8 ±4.9)、(11.0±6.8)万,哮喘2、4、8周组分别为(15.7±6.1)、(26.2±6.9)、(24.6±6.0)万,两组比较差异有统计学意义(td值分别为3.00、4.83、5.50,P均＜0.01);褪黑素组2、4、8周MMP-9 mRNA水平表达分别为0.80±0.40、0.68±0.15、0.67±0.24,哮喘2、4、8周组分别为1.48±0.29、1.40±0.50、1.20 ±0.40,两组比较差异有统计学意义(td值分别为3.92、4.50、3.29,P均＜0.01);地塞米松组2、4、8周Wcol/Pbm(11.6±1.3、12.3±1.0、13.0±1.7)μm2/μm、MMP-9蛋白[(12.5±5.6)、(14.0±4.7、13.6±4.8)万]和mRNA水平(0.69±0.11、0.61±0.16、1.10±0.40)均较哮喘2、4、8周组降低.褪黑素拮抗2周组与哮喘2周组以上各指标比较差异均无统计学意义(td值=0.96,P＞0.05).结论 早期使用褪黑素可抑制胶原沉积,其作用与地塞米松相当.褪黑素可能通过MMP-9介导的途径抑制哮喘气道重塑.