摘要目的 探讨miR-675对低氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的调控作用及相关机制.方法 低氧(1％O2)处理PASMCs 48 h,利用Real time-PCR检测0、6、12、24和48 h时各个时相点miR-675的表达水平,应用Western blot检测低氧处理PASMCs 48 h后靶基因REPS2蛋白的表达情况.先合成miR-675抑制剂(inhibitor)再将其和阴性对照(NC)转染PASMCs细胞,24 h后再进行低氧处理从0h至48 h,应用MTT法检测0、12、24、48 h时细胞的活力,并检测REPS2蛋白的表达状况.构建野生型和突变型REPS2 3'UTR插入pMIR-REPORTTM luciferase vector载体,并将其与pRL-TK质粒共转染PASMCs细胞,之后将miR-675 inhibitor和NC分别转染PASMCs细胞,利用双荧光素酶报告基因检测活性.在常氧下先分别转染miR-675 inhibitor或模拟物(minic) 48 h,再检测PASMCs中REPS2的表达水平.结果 随着低氧处理时间的延长,miR-675在PASMCs细胞中的表达水平逐渐增高(P＜0.05).而与对照组比较,REPS2蛋白在低氧处理的PASMCs细胞中表达显著下调(P＜0.05).miR-675 inhibitor组在24h和48 h的细胞活力显著低于对照组和miR-NC组(P＜0.01).荧光素酶报告基因结果说明REPS2是miR-675的靶基因.在常氧环境上调miR-675可显著下调REPS2蛋白表达,而在常氧和低氧环境下抑制miR-675的水平可明显升高REPS2蛋白表达.结论 miR-675通过下游靶基因REPS2调控低氧诱导的PASMCs的异常增殖,可能是低氧肺动脉高压、肺源性心脏病等疾病治疗的潜在靶点.